home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Shareware Overload Trio 2 / Shareware Overload Trio Volume 2 (Chestnut CD-ROM).ISO / dir26 / med9410b.zip / M94A0286.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-10-08  |  3KB  |  45 lines
  1.        Document 0286
  2.  DOCN  M94A0286
  3.  TI    Expression of active, processed ricin in transgenic tobacco.
  4.  DT    9412
  5.  AU    Sehnke PC; Pedrosa L; Paul AL; Frankel AE; Ferl RJ; Department of
  6.        Horticultural Sciences, University of Florida,; Gainesville 32611.
  7.  SO    J Biol Chem. 1994 Sep 9;269(36):22473-6. Unique Identifier : AIDSLINE
  8.        MED/94357881
  9.  AB    The cDNA encoding the plant toxin precursor preproricin was introduced
  10.        into tobacco via Agrobacterium tumefaciens-mediated gene transfer.
  11.        Transgenic plants were assayed for type II ribosome-inactivating protein
  12.        expression and activity. Western blot analysis of soluble leaf extracts
  13.        using anti-ricin a-chain (RTA) antibodies identified 34- and 32-kDa
  14.        proteins, which were electrophoretically indistinguishable from castor
  15.        seed RTA. Analysis with anti-ricin b-chain (RTB) antibodies identified
  16.        both a 34-kDa protein major band, which co-migrated with castor seed
  17.        RTB, and a 30-kDa protein minor band. Enzyme-linked immunoassay of the
  18.        transgenic leaf extracts with anti-RTA and anti-RTB indicated microgram
  19.        per gram production on a fresh weight basis of soluble extractable
  20.        recombinant ricin. Sugar binding enzyme-linked immunoassay employing an
  21.        immobilized glycoprotein, asialofetuin, and anti-RTB antibodies
  22.        confirmed the characteristic type II ribosome-inactivating protein
  23.        galactose binding lectin activity of the recombinant ricin. The
  24.        enzymatic activity of recombinant ricin was characterized for cell-free
  25.        translation inhibition, as well as for overall cytotoxicity. A 50%
  26.        inhibitory dose of 3 x 10(-11) M was observed for the immunoreactive
  27.        leaf extract material using a rabbit reticulocyte translation inhibition
  28.        assay, while a 50% lethal dose of 1 x 10(-12) M was calculated with
  29.        human T-lymphotropic virus-1 infected leukemic T-cells.
  30.  DE    Agrobacterium tumefaciens  Animal  Base Sequence  Castor
  31.        Bean/GENETICS/METABOLISM  Cell Line  Cell Survival/DRUG EFFECTS  DNA
  32.        Primers  DNA, Complementary/METABOLISM  Electrophoresis, Polyacrylamide
  33.        Gel  Enzyme-Linked Immunosorbent Assay  *Gene Transfer  Human
  34.        HTLV-I/DRUG EFFECTS/PHYSIOLOGY  Molecular Sequence Data  *Plants,
  35.        Transgenic  Plasmids  Polymerase Chain Reaction  Protein
  36.        Precursors/*BIOSYNTHESIS/ISOLATION & PURIF/TOXICITY  Rabbits
  37.        Recombinant Proteins/BIOSYNTHESIS/ISOLATION & PURIF  Reticulocytes/DRUG
  38.        EFFECTS  Ricin/*BIOSYNTHESIS/ISOLATION & PURIF/TOXICITY  Support, U.S.
  39.        Gov't, P.H.S.  Tobacco/*METABOLISM  Translation, Genetic/DRUG EFFECTS
  40.        JOURNAL ARTICLE
  41.  
  42.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  43.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  44.  
  45.